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酵母雙雜交表達克隆

高通量研究蛋白相互租用

GeneCopeia已經構建了40,000多種人和小鼠OmicsLink™ AD-ORF和BD-ORF 融合表達載體,可以在體內高通量研究蛋白之間的相互作用。 

  • 在酵母雙雜交實驗中,編碼誘餌蛋白的基因克隆于OmicsLink™ pBD載體,可以表達帶有GAL4 DNA結合域的融合蛋白。編碼靶蛋白的基因克隆于 OmicsLink™ pAD載體,可以表達帶有GAL4轉錄激活域的融合蛋白。
  • 將上述兩種質粒共轉染到酵母細胞中。如果誘餌蛋白和靶蛋白相互作用,GAL4 DNA結合域和轉錄激活域會結合,進而激活lacZ報告基因的表達。因此誘餌和靶蛋白的相互作用可以通過酵母細胞的表型確定。
 

 

ORF表達克隆有100多種載體、不同啟動子以及標簽可選。