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GLuc-ON™ 啟動子報告克隆

產品簡介

GLuc-ON™ 啟動子報告克隆在GLuc報告基因上游插入一段1.2~1.5 kb的序列,這段插入序列與基因轉錄起始位點(TSS)上游大約1.5kb到下游200bp之間的5'側翼序列一致,可以通過觀察熒光素酶的活性來研究啟動子對基因的調節作用。

GeneCopoeia可提供預制和定制的GLuc-ON™ 啟動子克隆,包括單報告基因載體系統和雙報告基因載體系統。單報告基因載體系統以Gluc、 mCherry或GFP作為啟動子的報告基因;雙報告基因載體系統以Gluc作為啟動子報告基因,以分泌型堿性磷酸酶 (SEAP)作為信號標準化的內參,可在活細胞中對超過20,000種人和18,000種小鼠啟動子進行實時活性分析。

Promoter reporter clones mechanism of action

圖1. GLuc-ON™ 啟動子報告克隆的雙報告基因檢測原理圖。

 

優勢

活細胞分析

  • 分泌型Gluc報告子
  • 無需裂解細胞
  • 節省樣本,減少突變,簡化試驗流程(如脈沖追蹤分析等)

實時研究

  • 可獲得即時檢測數據
  • 與實時活性分析過程類似

分泌型雙報告系統

  • 分泌型Gluc和分泌型堿性磷酸酶
  • 對多樣本常規轉染進行精確比較

高通量兼容

  • 可用于信號通路研究
  • 可進行高通量研究

高靈敏度

  • GLuc比螢火蟲或Renilla熒光素酶靈敏度高1000倍

使用方便

  • 所有啟動子報告克隆均可直接用于細胞轉染

 

Gaussia 熒光素酶

GLuc-ON™ 啟動子克隆采用經過修飾的GLuc(mGLuc)作為報告基因,能產生強烈且穩定的熒光信號,克服了人野生型GLuc(wtGLuc)信號衰退快的缺點。

Signal stability of mGluc and wtGlucSignal stability of mGluc and wtGluc

圖2. mGLuc (藍色) 和 wtGLuc (紅色)的信號穩定性比較。左側:含有穩定劑的緩沖液;右側:常規緩沖液。

 

雙報告系統

GLuc-ON™ 啟動子克隆可以將分泌型堿性磷酸酶(SEAP)作為第二個報告子和內參。這種雙報告系統可以對多樣本常規轉染進行精確比較。

 

圖3. 不同啟動子在H1B1B和HEK293T細胞中的活性分析。雙報告系統啟動子克隆和對照以兩個重復轉染進兩種細胞中。轉染24小時((HEK293T)和48小時(H1B1B)后分析樣品。NEG(包含非啟動子序列)和EMPTY(載體不含啟動子)作為陰性對照。

載體和對照

載體類型

載體 報告基因 內參基因 篩選標記 載體類型
pEZX-PG04 Gaussia luciferase (GLuc) 分泌型堿性磷酸酶(SEAP) Puromycin 非病毒
pEZX-PG02 Gaussia luciferase (GLuc) N/A* Puromycin 非病毒
pEZX-PF02 eGFP N/A* Puromycin 非病毒
pEZX-PM02 mCherry N/A* Puromycin 非病毒
pEZX-LvPG04 Gaussia luciferase (GLuc) 分泌型堿性磷酸酶((SEAP) Puromycin 慢病毒
pEZX-LvPG02 Gaussia luciferase (GLuc) N/A* Puromycin 慢病毒
pEZX-LvPF02 eGFP N/A* Puromycin 慢病毒
pEZX-LvPM02 mCherry N/A* Puromycin 慢病毒
pEZX-LvPM03 tdTomato N/A* Puromycin 慢病毒

* SEAP可以在分泌型載體中表達。

 

對照克隆和SEAP表達克隆

購買 貨號 產品 描述 載體 價格(¥)
GAPDH-PF02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single GFP reporter vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-LvPF02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single GFP reporter lentiviral vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-PG02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single-reporter vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-LvPG02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single-reporter lentiviral vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-PG04 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in dual-reporter vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-LvPG04 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in dual-reporter lentiviral vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-PM02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single mCherry reporter vector GAPDH positive control clone 875
GAPDH-LvPM02 GAPDH positive control clone House keeping gene promoter positive control in single mCherry reporter lentiviral vector GAPDH positive control clone 875
NEG-PF02 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in single GFP reporter vector Negative control clone 875
NEG-LvPF02 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in single GFP reporter lentiviral vector Negative control clone 875
TR001 TRE negative control clone pEZX-PG02 2400
NEG-LvPG02 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in single-reporter lentiviral vector Negative control clone 875
NEG-PG04 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in dual-reporter vector Negative control clone 875
NEG-LvPG04 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in dual-reporter lentiviral vector Negative control clone 875
NEG-PM02 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in single mCherry reporter vector Negative control clone 875
NEG-LvPM02 Negative control clone Non-promoter sequence negative control in single mCherry reporter lentiviral vector Negative control clone 875
SEAP-PA01 Secreted alkaline phosphatase (SEAP)
Expression clone
Express SEAP.
Can be used for co-transfection with promoter clone
pEZX-PA01 875
SEAP-LvPA02 Secreted alkaline phosphatase (SEAP) expression clone Express SEAP in a lentiviral vector. Can be used for co-transduction with a promoter clone pEZX-PA02 875

 

Tear Away License

Tear away license for gaussia luciferase users

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