miArrest™ miRNA抑制劑

 

產品介紹

miRNA抑制劑可以特異、高效地抑制生物體內源性miRNA的活性,是研究miRNA功能缺失的重要工具。GeneCopoeia提供慢病毒或非病毒載體的miArrest™ miRNA抑制劑表達克隆和化學合成的miRNA抑制劑。

 

miArrest™ miRNA抑制劑克隆可以特異性地結合目的miRNA,瞬時和穩定地抑制miRNA的功能,采用H1或者U6啟動子驅動轉錄可以保證在大多數哺乳動物細胞中高水平表達。

 

優勢

覆蓋面廣

  • 針對所有已知的人、小鼠和大鼠miRNA

靈活的載體選擇

  • 慢病毒載體可轉導普通細胞和難轉染、未分化細胞
  • 非病毒載體可進行穩定或瞬時轉導

先進可靠的設計

  • 表達框經過專利算法設計并經過嚴格的實驗驗證

抑制性能優越

  • 與其他化學合成的miRNA抑制劑相比具有更強、更持久的抑制作用和極低的細胞毒性(參照表1
  • 采用H1或U6啟動子保證在大多數哺乳動物細胞中高水平表達

高通量兼容

  • 快速簡便的實驗設計
  • 可同時檢測多個樣

 

 
HEK293細胞中共轉染miR-125a 抑制劑表達質粒 (GeneCopoeia HmiR-AN0094-AM01) 、miR-125a 前體表達質粒(GeneCopoeia HmiR0309-MR03) 和miR-125a的靶標克隆質粒(GeneCopoeia HmiT019205-MT02:將LIN28 的3’UTR克隆到Gaussia熒光素酶-堿性磷酸酶雙報告載體)。轉染24小時后檢測報告基因Gaussia 熒光素酶和參照基因堿性磷酸酶的活性。只轉染Gluc-LIN28-3’-UTR質粒的細胞中Gaussia 熒光素酶與堿性磷酸酶活性比值設為1 (左數第一條柱),用來標準化其他細胞樣品中的報告基因活性。結果表明miR-125a抑制了Gluc-LIN28-3’-UTR中Gluc 70%以上的活性(左數第二條柱)。這種抑制效應可被導入的不同劑量的miR-125a抑制劑表達質粒特異性的阻遏。轉染100 ng 抑制劑表達質粒時,細胞內報告基因/參照基因活性比值(右數第一條)已超出單獨轉染Gluc-LIN28-3’-UTR報告質粒的對照組。這說明miR-125a抑制劑可以阻遏外源和內源性的miR-125a對靶標基因的抑制,提高GLuc-LIN28-3’-UTR轉錄本的翻譯水平。

圖1. 不同劑量miArrest™ miRNA抑制劑克隆對靶miRNA抑制作用的對比

  基于克隆載體的抑制劑 2'-甲氧修飾的抑制劑 化學合成的LNA抑制劑
抑制效力 +++++ ++ ++
特異性 +++++ +++ +++
穩定性 +++++ + +++
持久性 Long term Transient Transient
細胞毒性 +
導入細胞難易程度 +++++
表1. 基于克隆表達載體的和化學合成的miRNA抑制劑的比較

 

miRNA 抑制劑克隆導入細胞后表達的miRNA抑制劑(miArrest)特異地結合它們的靶miRNA。miRNA抑制劑轉錄后折疊形成一個穩定的陷阱結構,可以結合兩分子靶miRNA。

miArrest™高效、特異地結合細胞內成熟的靶miRNA,阻止了miRNA對靶標mRNA的降解或者翻譯抑制,上調miRNA靶標基因的表達。

獨特的載體設計確保最大的特異性、抑制強度、抑制作用持久度和最低的脫靶效應。

 

圖2. miRNA抑制劑表達克隆的作用機理

 

 

載體     

miRNA抑制劑表達克隆載體                                                

載體 報告基因 篩選標記 啟動子 載體類型
pEZX-AM01 mCherry Puromycin H1 Mammalian
pEZX-AM02 mCherry Puromycin U6 Mammalian
pEZX-AM03 mCherry Hygromycin H1 HIV
pEZX-AM04 mCherry Hygromycin U6 HIV

 

 

慢病毒載體的miRNA抑制劑表達克隆

 

GeneCopoeia提供客戶定制的慢病毒載體miRNA抑制劑表達克隆,周期2-5周。

 

化學合成的miRNA抑制劑

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克隆套裝

miRNA抑制劑表達克隆套裝

GeneCopoeia除了提供單個克隆,也提供預制和定制的miRNA抑制劑表達克隆套裝。了解詳情請點擊聯系我們或撥打400-6020-200。

貨號 產品描述 miRNA 載體 價格
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Various Human cancer miRNA inhibitor clone sets (lentiviral) Various
View all cancer sets below
pEZX-AM03 Inquire
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貨號 產品描述 癌癥 miRNA 價格
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