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AviTag™ 生物素相關試劑

生物素連接酶 (Biotin Ligase)由birA基因編碼所得,能活化生物素形成生物素酰 -5'-腺苷酸,將生物素特異地轉移到生物素受體標簽蛋白(如AviTag 融合蛋白)上,使標簽蛋白生物素化,也可用作生物素操縱子阻礙物。又名為:生物素操縱子阻礙蛋白(biotin operon repressor protein)、birA、生物素酶合成酶(biotin holoenzyme synthetase)、生物素-乙酰輔酶a羧化酶合成酶(biotin-[acetyl-CoA carboxylase] synthetase)。

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B0101A Biotin Ligase 100 µl, 750 U/µl ¥1000

 

 

生物素連接酶的相關菌株

AVB 100菌株

AVB100是一種大腸桿菌E. coli K12菌株 [MC1061 araD139 delta(ara-leu)7696 delta(lac)l74 galU galK hsdR2(rK-mK+) mcrB1 rpsL(Strr)]。該菌株的染色體帶有穩定轉入的birA基因。

在該菌株中,BirA蛋白的過表達可由阿拉伯糖誘導所得。穩定轉入的birA基因不需使用抗生素維持。在AVB100使用IPTG誘導的載體如Avidity's pAC、pAN、pATN 和pATC AviTag載體,可獨立調控目的基因及BirA的表達水平。該菌株僅限個人研究使用,不可分銷,使用前請閱讀產品的相關許可證明。

AVB99菌株

AVB99是一種帶有pACYC184質粒的大腸桿菌E.coli (XL1-Blue),該質粒包含IPTG誘導的birA基因,可過表達生物素連接酶(pBirAcm),是一個低拷貝數的質粒。培養含該質粒的菌株可使用10 µg/mL濃度的氯霉素。

AVB101菌株

AVB101是大腸桿菌E. coli 的B菌株(hsdR, lon11, su1A1),內含pACYC184質粒,該質粒含有IPTG誘導的birA基因,可過表達生物素連接酶(pBirAcm)。該菌株生長快速且健康,不含添加OmpT或Lon蛋白酶,是理想的蛋白表達工具菌株。

生物素連接酶及AviTag蛋白的表達均由IPTG (1 mM)誘導。誘導階段必須添加生物素,添加至其終濃度為50 µM。pAN及pAC載體需添加氨芐青霉素維持,抗生素濃度建議為100 µg/mL。

Avidity's AVB99及AVB101的質粒特性:

  • 質粒骨架為pACYC184;
  • 其中1.3 Kb片段含有插入了EcoRV位點的lacIq(因此可干擾tetR基因);
  • BirA由乳糖啟動子操縱子調控表達;
  • rrnB終止子結構位于laqIq區域,可破壞pACYC184的XbaI位點。

 

 

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Biotinylation Strains
AVB101 Efficient Biotinylation E. coli B Strain AVB101 1 vial, containing 0.5 mL of glycerol stock ¥2400
AVB100 Efficient Biotinylation E. coli K12 Strain AVB100 1 vial, containing 0.5 mL of glycerol stock ¥2400
Avidity Vectors
PAN4 Biotin AviTag™ Vectors (N-terminal) 10 μg ¥1584 each
PAN5 Biotin AviTag™ Vectors (N-terminal) 10 μg ¥1584 each
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PAC4 Biotin AviTag™ Vectors (C-terminal) 10 μg ¥1586 each
PAC5 Biotin AviTag™ Vectors (C-terminal) 10 μg ¥1586 each
PAC6

Biotin AviTag™ Vectors (C-terminal)

10 μg

¥1586 each